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樣品的提取和凈化的方法?

發布人: admin     發時間: 2021-02-23     瀏覽次數:1699

1.提取

農藥殘留樣品提取的原則是根據農藥理化性質按相似相溶原bai理進行。

一般而言,極性較小的農藥可以用石油醚、正己烷、環己烷等非極性溶劑或與極性溶劑混合的溶劑提取。極性較強的農藥可以用極性溶劑或含水極性溶劑,如丙酮、甲醇等。含水較多的植物樣品可以用與水能相混溶的極性溶劑,如丙酮、乙腈等。干樣或低含水量的樣品可以加少量水潤濕,再用適當溶劑提取。含水量高的試樣可以先加無水硫酸鈉,使水溶性較強的農藥釋放,再用有機溶劑提取。依極性由強到弱順序排列的常用溶劑:乙酸、水、乙腈、甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷、二氯甲烷、正己烷、石油醚。

提取的方法一般有組織搗碎法(大部分動植物樣品采用搗碎法提取)、振蕩浸取法(樣品+提取溶劑置振蕩器上振蕩提取)、消化法(用于動物組織樣品)、索氏提取法(提取效率高,但提取時間較長)、超聲波提取法、超臨界提取法(無需有機溶劑,選擇性強,無需凈化)。

樣品的濃縮一般有吹掃法、減壓蒸餾法,但要注意不能把溶劑蒸干。

2.凈化

當用溶劑提取樣品中殘留農藥時,會帶入若干干擾雜質,如色素、脂肪、蠟質等。所以,要進行樣品凈化。一般的凈化方法有:

(1)液—液分配法。利用待測農藥與干擾雜質在兩種互不相溶的溶劑中溶解度(分配系數)的差異達到分離凈化的目的。采用極性溶劑與非極性溶劑配成溶劑對進行液—液分配。如甲醇—二氯甲烷、甲醇—正己烷(石油醚)、甲醇—三氯甲烷等。

(2)吸附柱層析法。在層析柱中用淋洗劑淋洗,達到分離凈化的目的。常用的吸附劑有硅鎂型吸附劑(如氟羅里硅土,Florisil)、氧化鋁、硅膠、活性炭和硅藻土等。

(3)磺化法。利用濃硫酸與樣品提取液中的脂肪、蠟質、色素等雜質中所含烯鏈的磺化作用,生成強極性物質,從而與非極性農藥分離。

(4)凝結劑沉淀法。使用凝結劑將雜質沉淀的凈化方法。

3.固相萃取(SPE)

固相萃取的基本原理與開放式柱色譜相同。常用的吸附柱填料有氟羅里硅土、氧化鋁和硅膠。由于共萃物的極性,因此一般用不同極性的淋洗液淋洗。氟羅里硅土對親脂性化合物有特別的吸附作用,因此氟羅里硅土特別適于油性樣品的凈化,用低極性溶劑洗脫氟羅里硅土柱,非極性農藥殘留的回收率很高,因此氟羅里硅土是常用的填料。氧化鋁可以代替氟羅里硅土,特別是分析某些脂肪含量高的樣品,氧化鋁可分解某些有機磷酸酯,極性共萃物一般不能從中性和酸性氧化鋁中洗脫出來,因此可以在某些分析中代替氟羅里硅土。

4.超臨界流體萃取(SFE)

超臨界流體萃取是近幾年出現的一種特殊分離技術。SFE主要使用超臨界狀態的CO2作萃取劑,兼有氣體的滲透能力和液體的分配作用。流出液中的CO2在常壓下揮發,待測物用溶劑溶解后進行分析。SFE可以通過調節淋洗液的極性來提高萃取的選擇性,以萃取不同物化性質的殘留農藥。SFE是近幾年才發展起來的,很多實驗參數和條件還有待進一步優化和明確。萃取液的壓力、溫度已能很好的控制,但其他一些問題,如細胞組織的萃取、萃取液通過細胞時的速度、滯留時間、樣品物質的干擾等還需要進一步的研究。

5.基質固相分散(MSPD)

MSPD是1989年由美國Louisiana州立大學的Barker教授提出并給予理論解釋的一種嶄新的SPE技術。其基本操作是將試樣直接與適量反相填料(C18和C14)研磨、混勻制成半固態裝柱淋洗。MSPD濃縮了傳統的樣品前處理中所需的樣品勻化、組織細胞裂解、提取、凈化等過程,避免了樣品均化、轉溶、乳化、濃縮等造成的待測物損失。經MSPD柱后的淋洗液可直接通過Florisil柱進一步凈化,植物樣品中的極性有機物如葉綠素、甘油三酯等被Florisil吸附。的流出液可直接進色譜分析。MSPD自1989年提出之后,已在農藥殘留分析中得到廣泛應用,顯示了MSPD良好的通用性和發展潛力。MSPD是簡單高效的提取凈化方法,適用各種分子結構和極性農藥殘留的提取凈化。MSPD首先提高了分析速度,使現場監測成為可能,其次減少了試劑的用量。另外,MSPD更適于自動化分析。

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